R2-Pfu Hi-Fi DNA Polymerase
ADN polimerasa de alta fidelidad con actividad proofreading 3′→5′
Características Principales
Concentración: 1 U/µL
Fidelidad: ~10× mayor que Taq (1.6×10⁻⁶/bp/duplicación)
Velocidad: ~30-40 nt/s (0.2-0.4 kb/min) a 72°C
Actividad 3′→5′ exonucleasa (proofreading)
Genera productos con extremos romos (blunt-ended)
Cofactor requerido: Mg²⁺ (2-4 mM MgSO₄)
Temperatura óptima: 72°C
Alta termoestabilidad (mayor que Taq a 100°C)
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Descripción del Producto
La R2-Pfu Hi-Fi DNA Polymerase es una enzima termoestable de alta fidelidad derivada del archaeon hipertermófilo Pyrococcus furiosus. Esta enzima se caracteriza por su excepcional precisión durante la síntesis de ADN, siendo ideal para aplicaciones que requieren amplificación de alta fidelidad.
Posee actividad exonucleasa 3′→5′ (proofreading), lo que le permite corregir errores durante la síntesis de ADN, resultando en una tasa de error aproximadamente 10 veces menor que Taq polymerase (1.6×10⁻⁶/bp/duplicación).
Concentración: 1 U/µL
Ventajas Principales
- Fidelidad superior: Tasa de error significativamente menor comparada con polimerasas convencionales (~10× mayor que Taq)
- Actividad proofreading: Exonucleasa 3′→5′ que corrige bases mal incorporadas
- Alta termoestabilidad: Mayor estabilidad que Taq a temperaturas elevadas
- Clonación blunt-end: Productos listos para ligación en vectores de extremos romos
Origen y Producción
R2-Pfu Hi-Fi DNA Polymerase se produce de forma recombinante en células de Escherichia coli transformadas con el gen pol clonado de Pyrococcus furiosus. La enzima pertenece a la Familia B (tipo α) de ADN polimerasas y se purifica a alta homogeneidad.
Propiedades Físicas
Propiedades Enzimáticas
Velocidad de Extensión
~30-40 nt/s (0.2-0.4 kb/min) a 72°C. Más lenta que Taq, requiere ~2 min/kb de extensión.
Fidelidad
1.6×10⁻⁶/bp/duplicación (~10× mejor que Taq)
Cofactor Requerido
Mg²⁺ (como MgSO₄): 2-4 mM